Болезни собак: 200 / Книги о животных / Мир животных.ру

При гистологическом исследовании для инфекционного гепатита характерны
внутриядерные включения типа Рубарта. Чаще всего они встречаются в печеночных клетках
Купфера, в эндотелии сосудов, в ретикулярных клетках всех органов, особенно селезенки,
почек и лимфатических узлов. В большинстве случаев внутриядерные тельца могут быть
эозинофильными или окрашенными в нейтральный цвет Форма их круглая или овальная.
Структура гомогенная. Между включением и ядерной оболочкой, как правило, имеется
оптически пустая зона, в которой у отдельных клеток хорошо видны тонкие хроматиновые
тяжи.
Для гистологического исследования при вскрытии животных отдельно из разных долей
печени берут несколько кусочков толщиной не более 1 см, которые фиксируют в 10%-ном
нейтральном формалине не менее 2-3 дней. После фиксации из кусочков вырезают
пластинки толщиной 4- 5 мм, тщательно отмывают их проточной водой и на
замораживающем микротоме делают гистологические срезы толщиной 6-7 мкм.
Окрашивают их гематоксилинэозином по общепринятой методике. Сформированные тельца
Рубарта располагаются чаще всего в центре ядер печеночных клеток и имеют размер от 0,5
до 0,75 мкм/ Вначале они оксифильные, рыхлые, с размытыми нечеткими краями, а в
дальнейшем базофильные, с четко очерченными краями.
Диагноз. Инфекционный гепатит диагностируют на основании эпизоотологических,
клинических и патологоанатомических данных, а также вирусологических исследований и
биопробы.
В качестве исследуемого материала у больных собак в период острого течения болезни
берут сыворотку крови, а у павших животных – асцитную жидкость или печень. Суспензию
из печени готовят общепринятым методом и заражают чувствительных животных или
культуру ткани, приготовленную из почек щенков собак. Экспериментально гепатит можно
воспроизвести у собак, лисиц и песцов, использовав для этой цели животных 4-6-месячного
возраста, предварительно проверенных на инфекционный гепатит.
Болезнь воспроизводится закономерно и в типичной форме при заражении в переднюю
камеру глаза или в вену. У зараженных животных симптомы болезни проявляются на 6- 7-й
день.
В зараженной культуре ткани почек собак вирус размножается с характерными
цитопатическими изменениями: появлением отдельных округлившихся рефрактильных
клеток, которые постепенно отторгаются от стекла. По мере развития инфекции число
клеток, подвергшихся дегенерации, увеличивается и образуются большие пустоты в
монослое. По краям сохранившихся островков пораженные клетки концентрируются,
образуя большие конгломераты, напоминающие грозди винограда. Специфичность
цитопатических изменений подтверждается в реакции нейтрализации. В культуре клеток
после заражения через 20-30 ч образуются характерные внутриядерные включения, которые
хорошо обнаруживаются при окраске препаратов или методом флюоресцирующих антител.
Реакция преципитации в геле. Для диагностики инфекционного гепатита широко
используют реакцию преципитации в агаровом геле. Простота постановки реакции, ее
высокая чувствительность и строгая специфичность позволяют поставить диагноз в течение
24-48 ч, а также установить антигенное родство различных штаммов.
Реакция может быть применена для лабораторной диагностики в случаях
остропротекающего заболевания, поскольку преципитирующий антиген обнаруживается у
больных животных на 2-3-й день после заражения в различных органах и тканях, а также для
выявления перенесенного ранее процесса, так как антитела у переболевших собак могут
сохраняться несколько лет.
Для постановки реакции преципитации требуются следующие компоненты: тестирующая
система, состоящая из антигена вируса инфекционного гепатита собак, специфической
гипериммунной сыворотки против вирусного гепатита, контрольного положительного
антигена, контрольного отрицательного антигена.